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人整合素α4酶聯(lián)免疫試劑盒操作步驟

點(diǎn)擊次數:303 更新時(shí)間:2024-06-05

人整合素α4酶聯(lián)免疫試劑盒操作步驟:

1. 編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照 2 孔、陽(yáng)性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)

2. 加樣:分別在陰、陽(yáng)性對照孔中加入陰性對照、陽(yáng)性對照 50%l。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液 40%l,然后再加待測樣品 10%l。加樣將樣品加 于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,

3. 溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。

4. 配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此重復 5 次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標試劑 50%l,空白孔除外。

7. 溫育:操作同 3。

8. 洗滌:操作同 5。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑 A50%l,再加入顯色劑 B50%l,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15 分鐘.

10. 終止:每孔加終止液 50%l,終止反應(此時(shí)藍色立轉黃色)。

11. 測定:以空白空調零,450nm 波長(cháng)依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止液后 15 分鐘以?xún)冗M(jìn)行。

 

 

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